สไลด์การสาธิตการทำ Cellulose Acetate Electrophoresis คณะผู้จัดทำ : 1. รศ. ดร. อาภัสสรา ชูเทศะ 2. นายสมหมาย หอมสวาท 3. น.ส. อรพรรณ สังข์สัมฤทธิ์ ภาควิชาสรีรวิทยา คณะสัตวแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์
อ่างแช่แผ่น cellulose acetate rack วางแผ่น cellulose acetate
applicator ช่องบรรจุสารตัวอย่าง ฐานวางแผ่น cellulose acetate
อ่าง electrophoresis power supply
กระดาษกรองหรือ wick แผ่น cellulose acetate และบัฟเฟอร์
ใส่สารละลายบัฟเฟอร์ประมาณ 100 ml ในอ่างขั้วลบ
ใส่สารละลายบัฟเฟอร์ประมาณ 100 ml ในอ่างขั้วบวก
ใช้กระดาษกรอง(wick) 2 แผ่นที่ชุ่มด้วยบัฟเฟอร์มาวางพาดตรงที่กั้นอ่างทั้ง 2 โดยปลายด้านหนึ่งของกระดาษกรองจุ่มอยู่ในบัฟเฟอร์ในอ่าง เพื่อเชื่อม ระหว่างแผ่น cellulose acetate กับบัฟเฟอร์ในอ่าง
การวางแผ่น wick ในอ่างขั้วบวก
micropipette และสารตัวอย่าง ดูดสารตัวอย่างใส่ลงในช่องบรรจุ
ช่องบรรจุมีสารตัวอย่างครบทั้ง 8 ช่อง ปิดช่องสารตัวอย่างด้วยแผ่นสไลด์ ป้องกันการระเหย
ตัดมุมหนึ่งของแผ่น cellulose acetate เพื่อให้ทราบตำแหน่งของสารตัวอย่าง และด้านขั้วบวก/ขั้วลบ นำแผ่น cellulose acetate มาวางใน rack
นำแผ่น cellulose acetate มาแช่ในสารละลายบัฟเฟอร์ ตามเวลาที่กำหนด
เมื่อครบกำหนดเวลา นำแผ่น cellulose acetate มาซับให้แห้งโดยใช้กระดาษกรอง อยู่ตรงเส้น center application หรือ cathode application
กด applicator ลงในช่องบรรจุสารตัวอย่าง3-4ครั้ง นำ applicator มากดลงบน แผ่น cellulose acetate นาน 5 วินาที
นำแผ่น cellulose acetate มาวางพาดระหว่างอ่างทั้ง 2 โดยวางคว่ำหน้า
ปิดฝาอ่าง เปิดเครื่อง power supply ตั้งศักย์ไฟฟ้าและเวลาตามที่กำหนด
สีย้อม Ponceau S สารละลายล้างสีย้อม methanol และสารละลาย clearing
ย้อมแผ่น cellulose acetate ด้วย Ponceau S ล้างสีย้อมด้วย acetic acid
ล้างสีย้อมจน background ไม่มีสี แช่แผ่น cellulose acetate ใน methanol
หลังอบที่ 600C จะได้แผ่นใส นำไปวิเคราะห์ผลต่อได้ แช่แผ่น cellulose acetate ในสารละลาย clearing