งานนำเสนอกำลังจะดาวน์โหลด โปรดรอ

งานนำเสนอกำลังจะดาวน์โหลด โปรดรอ

1 Comparable between Rapid One Step Immunochromatographic Assay and ELISA in the Detection of Prostate Specific Antigen in Vaginal Specimens of Raped Women.

งานนำเสนอที่คล้ายกัน


งานนำเสนอเรื่อง: "1 Comparable between Rapid One Step Immunochromatographic Assay and ELISA in the Detection of Prostate Specific Antigen in Vaginal Specimens of Raped Women."— ใบสำเนางานนำเสนอ:

1 1 Comparable between Rapid One Step Immunochromatographic Assay and ELISA in the Detection of Prostate Specific Antigen in Vaginal Specimens of Raped Women Vichan Peonim MD*, J Med Assoc Thai 2007; 90 (12):

2 2

3 3  เพื่อพิสูจน์เปรียบเทียบคุณภาพความ แม่นยำ - rapid one step test kit - ELISA  สรุปสิ่งที่เป็นประโยชน์ของวิธีการตรวจ เพื่อที่ให้เหมาะสมในการ นำมาใช้อย่าง กว้างขวางในงานบริการประจำ

4 4 ความสำคัญ  ขาดประจักษ์พยานที่พบเห็นผู้กระทำ ผิด  การพิสูจน์หลักฐานทางชีววิทยา ในทางนิติวิทยาศาสตร์  ใช้สืบหาผู้กระทำความผิด

5 5 ในช่องคลอดของผู้เสียหาย (Vaginal Specimens of Raped Women) ตัวอสุจิ (sperm) จากกล้องจุลทรรศน์ น้ำอสุจิ (semen) – สารชีวเคมีที่เป็นส่วนประกอบใน semen การพิสูจน์หลักฐานทาง ชีววิทยาในทางนิติ วิทยาศาสตร์

6 6 ปัญหาและที่มา การตรวจหาเอนไซม์ Acid phosphatase test ทดสอบยืนยันผลด้วยวิธีการตรวจหา PSA (prostate specific antigen) การวิเคราะห์ PSA เป็นแบบ quantitative ด้วยวิธีการวิเคราะห์ของ ELISA Rapid one step test kit (semi- quantitative) ยังไม่นิยมใช้ในงานประจำ

7 7 ข้อดีข้อเสีย ELISA-Quantitative -Cut off ต่ำ - แพง - ยุ่งยาก - ใช้ผู้เชี่ยวชาญ Rapid test kit - ถูก - ใช้งานง่าย - ไม่ใช้ ผู้เชี่ยวชาญ Semi- quantitative เปรียบเทียบการใช้งาน

8 8

9 9 E1, P30 สารจำพวก glycoprotein ที่ผลิตจาก ต่อม prostatic ยีนของ PSA อยู่บน chromosome 19 โดยปกตินั้น PSA ใช้เป็นตัวบ่งชี้มะเร็ง ต่อมลูกหมาก

10 10 ภาพแสดงอวัยวะเพศชาย

11 11 โครงสร้างหลัก ได้แก่ ส่วนหัว และส่วนหาง จากนั้นก็แบ่งตัวแบบ meiosis

12 12 ตัวอสุจิ ( ดูสด ) ภายใต้ กล้องจุลทรรศน์ ตัวอสุจิ ( ย้อมสี ) ภายใต้ กล้องจุลทรรศน์

13 13 ตัวอสุจิที่ผิดปกติ

14 14 ส่วนที่เป็นเซลล์ คือ ตัวอสุจิ (spermatozoa) ส่วนที่เป็นของเหลว คือ พลาสมา (seminal plasma)

15 15 ใน 1 ลูกบาศก์เซนติเมตร มีตัวอสุจิ ประมาณ ล้านตัว ปริมาณของน้ำอสุจิที่หลั่งแต่ละครั้ง ประมาณ 3-5 ลูกบาศก์เซนติเมตร Seminal vasicle ประมาณ 70% Prostate gland ประมาณ 13-33%

16 16  แอนติเจนหรือแอนติบอดีเกาะอยู่บน solid phase  แต่ละขั้นตอนจะต้องมีการแยกเอาสาร ส่วนเกินที่ไม่ได้ทำปฏิกิริยาออกไป  วิธีที่มีความไวและความจำเพาะสูง

17 17  เอนไซม์ที่นิยมใช้ในวิธีการ ELISA คือ Horseradish peroxidase (substate ที่นิยม คือ O-phenylene diamine ให้สีน้ำตาล ) alkaline phosphatase (substrate ที่นิยมคือ p-nitrophenyl phosphate ให้สีเหลือง )  Cut off 0.5 ng/ml

18 18

19 19 ตัวกลางยึดเกาะ (solid phase) กระดาษชนิด nitrocellulose หรือ nylon เมื่อทำปฏิกิริยา ตกตะกอนลงมาเกาะบนผิวกระดาษ ปรากฏสีสำหรับการอ่านผล ทำให้เกิดสี เช่น ผงทอง (colloidal gold)

20 20 การวิเคราะห์ PSA ของ rapid one step test kit test (mouse anti-human PSA Mc antibody) Antibody colloidal gold conjugate สิ่งส่งตรวจพบ PSA (specific antibody- PSA-color conjugate) การตรวจวิเคราะห์แบบนี้ใช้สารตัวอย่าง 100 µl ( 3 หยด ) cut off ของ PSA คือ 4 ng/ml

21 21

22 22 ขั้นตอนการตรวจ การตรวจร่างกายผู้เสียหาย การตรวจร่างกายผู้ต้องหา การตรวจทางห้องปฏิบัติการ  วัตถุพยานที่พบ  การตรวจหาเอนไซม์ Acid phosphatase  การดูคราบอสุจิด้วยเครื่องกำเนิด แสง  การตรวจ PSA (prostate specific antigen)  การตรวจยืนยันด้วยกล้องจุลทรรศน์

23 23

24 24

25 25 พยาธิวิทยา คณะแพทย์ศาสตร์ โรงพยาบาล รามาธิบดี มหาวิทาลัยมหิดล สิ่งส่งตรวจจำนวน 100 ตัวอย่าง ได้จากสูตร N = ที่ระดับความเชื่อมั่น 96% ;  = 0.05 หรือ 1-α/2 (alpha error two-tailed) Z = Z = 1.96

26 26 N = 59 ที่ระดับความ เชื่อมั่น 96% จากงานวิจัยอื่นตรวจพบ = 67.5% ต้องมีตัวอย่าง อย่างน้อย = 87 ตัวอย่าง

27 27 - Cotton swab - กระดาษกรองที่มีพื้นที่ 0.3 x 0.3 cm - ใส่ในหลอดทดลองที่มีน้ำกลั่น (DW) 2 ml ปั่นเหวี่ยง 3 นาที - นำไปทดสอบด้วย rapid one step test kit และ ELISA

28 28 ทั้ง 2 หลักการ ตรวจสอบหาตัวอสุจิโดยการดูภายใต้กล้อง จุลทรรศน์ (gold standard) เปรียบเทียบ sensitivity, accuracy,specificity, positive predictive value, negative predictive value

29 29

30 30 TP FP FN TN

31 31

32 32

33 33 ในประเทศที่พัฒนาแล้วใช้วิธีการทดสอบ แบบ rapid one step test kit เพื่อการ ตรวจแยกใน seminal fluid ผลการทดลองของวิธีทั้งสองนั้นเมื่อ เปรียบเทียบแล้วไม่มีความแตกต่างกัน ยกเว้น sensitivity negative predictive value ค่าจากการคำนวณของ rapid kit ดีกว่า ELISA

34 34

35 35 สรุป rapid one step test kit นำมาใช้ การตรวจ PSA ในช่องคลอดในคดี ข่มขืนกระทำชำเราที่ทำในงาน ประจำได้อย่างเหมาะสม

36 36 อาจารย์ที่ปรึกษา อ. ธงชัย เตโช วิศาล


ดาวน์โหลด ppt 1 Comparable between Rapid One Step Immunochromatographic Assay and ELISA in the Detection of Prostate Specific Antigen in Vaginal Specimens of Raped Women.

งานนำเสนอที่คล้ายกัน


Ads by Google