สไลด์การสาธิตการทำ Cellulose Acetate Electrophoresis

งานนำเสนอเรื่อง: "สไลด์การสาธิตการทำ Cellulose Acetate Electrophoresis"— ใบสำเนางานนำเสนอ:

1 สไลด์การสาธิตการทำ Cellulose Acetate Electrophoresis
คณะผู้จัดทำ : 1. รศ. ดร. อาภัสสรา ชูเทศะ 2. นายสมหมาย หอมสวาท 3. น.ส. อรพรรณ สังข์สัมฤทธิ์ ภาควิชาสรีรวิทยา คณะสัตวแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์

2 อ่างแช่แผ่น cellulose acetate
rack วางแผ่น cellulose acetate

3 applicator ช่องบรรจุสารตัวอย่าง ฐานวางแผ่น cellulose acetate

4 อ่าง electrophoresis power supply

5 กระดาษกรองหรือ wick แผ่น cellulose acetate และบัฟเฟอร์

6 ใส่สารละลายบัฟเฟอร์ประมาณ 100 ml ในอ่างขั้วลบ

7 ใส่สารละลายบัฟเฟอร์ประมาณ 100 ml ในอ่างขั้วบวก

8 ใช้กระดาษกรอง(wick) 2 แผ่นที่ชุ่มด้วยบัฟเฟอร์มาวางพาดตรงที่กั้นอ่างทั้ง 2
โดยปลายด้านหนึ่งของกระดาษกรองจุ่มอยู่ในบัฟเฟอร์ในอ่าง เพื่อเชื่อม ระหว่างแผ่น cellulose acetate กับบัฟเฟอร์ในอ่าง

9 การวางแผ่น wick ในอ่างขั้วบวก

10 micropipette และสารตัวอย่าง
ดูดสารตัวอย่างใส่ลงในช่องบรรจุ

11 ช่องบรรจุมีสารตัวอย่างครบทั้ง 8 ช่อง
ปิดช่องสารตัวอย่างด้วยแผ่นสไลด์ ป้องกันการระเหย

12 ตัดมุมหนึ่งของแผ่น cellulose acetate เพื่อให้ทราบตำแหน่งของสารตัวอย่าง
และด้านขั้วบวก/ขั้วลบ นำแผ่น cellulose acetate มาวางใน rack

13 นำแผ่น cellulose acetate มาแช่ในสารละลายบัฟเฟอร์
ตามเวลาที่กำหนด

14 เมื่อครบกำหนดเวลา นำแผ่น cellulose acetate มาซับให้แห้งโดยใช้กระดาษกรอง
อยู่ตรงเส้น center application หรือ cathode application

15 กด applicator ลงในช่องบรรจุสารตัวอย่าง3-4ครั้ง นำ applicator มากดลงบน
แผ่น cellulose acetate นาน 5 วินาที

16 นำแผ่น cellulose acetate มาวางพาดระหว่างอ่างทั้ง 2 โดยวางคว่ำหน้า

17 ปิดฝาอ่าง เปิดเครื่อง power supply ตั้งศักย์ไฟฟ้าและเวลาตามที่กำหนด

18 สีย้อม Ponceau S สารละลายล้างสีย้อม methanol และสารละลาย clearing

19 ย้อมแผ่น cellulose acetate ด้วย
Ponceau S ล้างสีย้อมด้วย acetic acid

20 ล้างสีย้อมจน background ไม่มีสี
แช่แผ่น cellulose acetate ใน methanol

21 หลังอบที่ 600C จะได้แผ่นใส
นำไปวิเคราะห์ผลต่อได้ แช่แผ่น cellulose acetate ในสารละลาย clearing